پایان نامه بررسی اثرات کلینیکی ، رادیولوژیک و هیستو پاتولوژیک، آندروژن ها در استخوان سازی و التیام شکستگی ها

پایان نامه برای دریافت دکتری عمومی دامپزشکی D.V.M

چکیده

پیشینه و سابقه :

استروئید های جنسی برای رشد اسکلتی و کسب سلامت استخوانی در طول بلوغ لازم و ضروری هستند و کمبود استروژن در پوکی استخوان نقش دارد. مکانیسمهای تأثیرات اسکلتی استروئیدهای جنسی هنوز بطور کامل شناخته نشده اند، اما در سالهای اخیر پیشرفتهای قابل ملاحظه ای در دانش ما نسبت به استروژن ها ، و به میزان نسبتاً کمتری آندروژنها در بازسازی استخوان بوجود آمده است. بینش های جدیدی در مورد گیرنده های استروژن، کشفیات اخیر در زمینه افزایش فعالیت استئوکلاستها و آموخته هایی برگرفته از جهشهای ژنتیکی در انسان وحیوان،‌همه و همه در افزایش درک ما از تأثیرات اسکلتی استروژن در نر و ماده دخیل هستند.

- مسئله و ضرورت تحقیق:

استروئیدهای جنسی نقش ضروری در حفظ سلامت استخوان در سرتاسر عمر دارند و تأثیرات بدکمبود هورمون در حیوانات نر و ماده پیر و جوان دیده می شود، نحوه عملکرد این تأثیرات بطور کامل شناخته نشده اند و موضوعی برای تلاش گسترده تحقیقی می باشند اگر چه پیامدهای درمانی بالقوه در این زمینه قابل ملاحظه است. سؤالی که در این مرحله مطرح می شود اینستکه آیا این هورمونها بصورت آماری می توانند نقش معنی دار و تعیین کننده ای در استخوان سازی و التیام آن داشته باشند.

- هدف :

هورمونهای استروئیدی چگونه بعنوان یک راهکار و شاخص در شکستگیها و التیام استخوان در حیوانات نر عقیم شده و یا عقیم نشده و حتی در حیوانات ماده و حیواناتی که بنحوی دچار کمبود و اختلال هورمونهای استروئیدی هستند بکار گرفته شود.

- روش تحقیق: مطالعه تجربی

- جامعه آماری و شرح مراحل اجراء:

ده رأس خرگوش نر بالغ ظاهراً سالم از نوع آزمایشگاهی انتخاب شد و به روش اسکروتال عقیم گردیدند و روی استخوان درشت نی از سمت جانب چهارسوراخ به قطر 1 و 2 و 3 و 4 میلی متر در طول استخوان تعبیه شد و سپس به دو گروه تقسیم شدند.

گروه اول: در فواصل روزهای صفر و 7 و 14 و 21 و 28 و 35 و 42 و 50 و 57 داروی ناندرولون دکانوات بصورت عضلانی تزریق شد.

گروه دوم: داروی سیپروترون یک روز در میان تا روز 57 به خرگوشها خورانده شد.

متغیرهای مستقل: ناندرولون دکانوات و سیپروترون استات

متغیرهای وابسته: میزان تشکیل بافت استخوانی – میزان تشکیل کالوس – تحمل فشار

- فرضیه:

آندروژنها تا چه اندازه در التیام و بازسازی استخوان مؤثر هستند.

- روش جمع آوری داده ها: ارزیابی رادیوگرافیک که در روزهای صفر و 15 و 30 و 45 و 60 انجام شد.

ارزیابی هیستوپاتولوژیک که در روز آخر (60 روز) نمونه های استخوانی به آزمایشگاه پاتولوژی ارسال گردید.

ارزیابی وضعیت گام که در روزهای 1 و 7 و 14 و 28 و 35 و 42 و 50 و 60 انجام شد.

- روش آماری تجزیه و تحلیل اطلاعات:

در مورد ارزیابی زمانی رادیوگرافها که از توزیع طبیعی برخوردار بود از تستهای آنالیز واریانس[1] در سطح معنی دار 05/0 استفاده شد.

در مورد وضعیت گام که در مقیاس رتبه ای قرار داشتند.

آزمون کراسکال - ‌والیس[2] استفاده گردید محاسبات آماری با استفاده از برنامه آماری SPSS [3]انجام گردید.

نتایج: وضعیت گام خرگوشها در هر دو گروه از روز یک تا روز 60 بطور معنی داری بهبود می یابد. از طرفی بین دو گروه در زمانهای مختلف و بین زمانهای مختلف در هر گروه اختلاف معنی داری وجود ندارد. بجز در مورد روز یک و هفتم که این اختلاف کاملاً طبیعی است.

درارتباط با میزان کالوس تشکیل شده در دو گروه اختلاف معنی داری در بعضی زمانها وجود دارد به لحاظ پاتولوژی ارزیابی گروه اول و دوم بیانگر وقوع ترمیم و تشکیل کال استخوانی هر دو گروه بود ولی بطور مقایسه ای گروه اول کال وسیع تر و حجیم تری داشتند و کل روند ترمیم مراحل پیشرفته تری داشت.

واژه های کلیدی: ناندرولون- سیپروترون- التیام استخوان.

آدرس:

1- دکتر غلامرضا عابدی استادیار دانشگاه علوم تخصصی دامپزشکی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات.

2- دکتر پرویز تاجیک دانشیار دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران.

3- دکتر رضا صداقت استادیار دانشکده پزشکی دانشگاه شاهد تهران.

فصل اول

مقدمه و هدف

مقدمه و هدف

در چند دهه اخیر پیشرفتهای چشم گیری در فهم ما از چگونگی تأثیر استروئیدی جنسی برای رشد اسکلتی و کسب سلامت استخوان در دوره بلوغ لازم و ضروری هستند کمبود استروژن عمده ترین عامل در پیشرفت پوکی استخوان است.

مکانیسم های تأثیرات اسکلتی استروئیدی جنسی هنوز به طور کامل شناخته شده نیست (22و31و57).

اما در سالهای اخیر پیشرفتهای قابل ملاحظه ای در دانش ما نسبت به استروژنها و به میزان کمتری آندروژنها در بازسازی استخوان بوجود آمده است (31).

بینش های جدیدی در مورد گیرنده های استروژن، کشفیات اخیر در زمینه افزایش فعالیت استئوکلاستها و آموخته هایی برگرفته از جهشهای ژنتیکی در انسان و حیوان، همه و همه در افزایش درک ما از تأثیرات اسکلتی استروژن در نر و ماده دقیق هستند (30و33).

از طرفی عموماً ترمیم شکستگی استخوان در یک شیوه منظم و با اجزاء تشکیل دهنده مکانیکی و بیولوژیکی مناسب که در حال حاضر موجود است دنبال می شود .

تکنیکهای جراحی بهبود یافته و جراحیهای پیوندزدن به جراحان این اجازه را می‌دهد که شکستگی های استخوانی نسبتاً پیچیده را با نتیجه موفقیت آمیزی معالجه نمایند با وجود این بعضی عوارض متعاقب شکستگی ها در استخوان بوجود می آیدکه به دیرجوش خوردن استخوان،‌عدم جوش خوردن استخوان و بدجوش خوردن استخوان شکسته منجر می شود. هدف از این مطالعه عبارت از بهبود و افزایش قدرت مکانیکی و عمل استخوان برای وزن گیری بهتر و سریعتر ، جلوگیری از تأخیر درجوش خوردگی و عدم جوش خوردگی و در نهایت برگشت کارایی استخوان آسیب دیده است.

فصل دوم

کلیات

بافت استخوانی [4]

استخوان یا بافت استخوانی که اسکلت موجودات مهره‌دار را تشکیل می‌دهد، از سایر بافتهای نگهدارنده کاملاً متمایز است. بافت استخوانی سخت است و مانند سایر بافتهای پشتیبان از سلول‌ها، رشته‌های کلاژن، ماده بنیادی، پوشش خارجی و پوشش داخلی تشکیل شده است. تجزیه استخوان نشان می دهد که 62% آن مواد معدنی و 38% مواد آلی است. 85% از مواد معدنی فسفات کلسیم، 10% آن کربنات کلسیم و 5% بقیه سایر املاح است. اگر بافت استخوانی در اسید قرار گیرد، مواد معدنی آن حل شده و سختی خود را از دست داده، نرم می‌شود و کاملاً قابل بریدن می‌شود، این عمل را دکلسیفیکیشن[5]  گویند که شرح کامل آن در بخش هیستوتکنیک آمده است. عکس این عمل در تشکیل و رشد استخوان اتفاق می‌افتد.

عناصر بافت استخوانی

1- سلولهای استخوانی[6]

استخوان‌ها در نگهداری و محافظت اندامهای نرم، ذخیره مواد معدنی، تولید سلولهای خونی نقش دارند وتوسط عضلات اسکلتی جابجا می‌گردند.

سلول‌های مزانشیمی که سازنده سلول‌های استخوان‌ساز[7]  می‌باشند به دو گروه تقسیم می گردند. یکی سلولهای دوکی یا کشیده که دارای زوائد سیتوپلاسمی است و به نام سلولهای استخوانی غیرفعال می باشد[8] . دیگری سلولهای مکعبی یا استوانه‌ای شکل با هسته‌های قاعده‌ای که نسبت به تیغه‌های استخوانی عمود است و متریکس در بافت استخوانی توسط آنها ترشح می‌گردد، که به نام سلول‌های استخوانی فعال[9] خوانده می‌شوند. این سلول‌ها، سیتوپلاسمی بازوفیلی داشته و به سلولهای بالغ استخوانی یا استئوسیت[10] تبدیل می‌گردند. سلولهای اخیر ستاره‌ای شکل با هسته پهن، تیره و زوائد سیتوپلاسمی بلند فراوانی می‌باشند. این سلولها در حفراتی به نام لاکونا[11]  قرار دارند. (شکلهای1-2 و 2-2). در اطراف این حفرات، مجاری باریکی به نام کانالیکول[12]  موجود است که زوائد سیتوپلاسمی سلولها در این لوله‌های کوچک یا کانالیکول‌ها وارد می‌شود. زوائد سیتوپلاسمی این سلولها توسط اتصال با روزنه به یکدیگر متصل می‌شوند و از این راه یون‌ها و سایر مولکولهای کوچک براحتی از یک سلول به سلول دیگر انتقال می یابند. این ارتباط گاه تا 20 ردیف از سلولهای استخوانی را در دنبال هم امکان‌پذیر می‌کند (شکل‌های1-2 و 2-2).

(نمودار و تصاویر در فایل اصلی موجود است)

- رشته‌های کلاژن[1]

این رشته‌ها که جزیی از موادآلی استخوان هستند، از نوع رشته‌های کلاژن نوع یک می‌باشند که بسیار ظریف و در دسته‌هایی به ضخامت 3 تا 5 میکرون قرار دارند و به نام رشته‌های کلاژن استخوانی[2] نامیده می‌شوند. ناگفته نماند که این رشته‌ها جزیی از ماده بنیادی استخوان نیز محسوب می‌گردند

ماده بنیادی [1]

مواد معدنی که قسمت اعظم ماده بنیادی استخوان را تشکیل می‌دهد شامل فسفات کلسیم، کربنات کلسیم، هیدروکسی آپاتایت، [2]و مواد آلی آن از گلیکوزامینوگلیکان‌ها که از انواع کندروایتین سولفات‌های 4 و 6 است، بصورت سیمانی همراه با رشته‌های کلاژن به یکدیگر محکم می‌شوند و ایجاد تیغه‌های استخوانی (Lamellae) را می‌نمایند، که در استحکام استخوان موثراند. هر تیغه استخوانی فاصله بین ردیف‌های سلول‌های استئوسیت است که توسط ماده بنیادی، مواد کلسیمی و کلاژن پر شده است. گلایکوپروتئین‌های استخوان دارای قدرت جذب ترکیبات کلسیمی فراوان می‌باشد. (شکل 3-2)، (22).

تیغه‌های استخوانی که به ضخامت 3 تا 7 میکرون می‌باشند، از اختصاصات بافت استخوانی بالغ می‌باشد. استخوان اسفنجی به شکل تیغه‌های نامنظم قرار دارند و در حالی که تیغه‌های آنها توسط مغز استخوان از یکدیگر جدا شده‌اند، حفره حفره به نظر می‌رسند (شکل 3-2).

لازم به ذکر است برای نگهداری بلورهای آپاتایت یون فلوراید نیز ضروری است.

4- پوشش خارجی استخوان یا پریوست[3]

یک لایه همبندی ویژه‌ای است که سطح خارجی استخوان را به استثنای سطوح مفصلی می‌پوشاند و بر روی تیغه‌های استخوانی اطرافی خارجی قرار دارند. پریوست در نقاطی که تاندون و یا رباط به استخوان متصل می‌گردد بسیار محکم به تیغه‌های استخوانی می‌چسبد و با پوشش خارجی یکی می‌شود.

Abstract:

1- Bibliography and background:

the sexued steroids are a necessary for skeletal grow and bone safe during adult. And estrogen defect play a important role at osteoporosis. Mechanisms of skeletal effects from sexual steroids have not been recognized yet.

But at a current years, considerable progresses have made in our knowledge to estrogens and less amount to androgens for regeneration of bone.

New attitudes about receptors of estrogen, current discoveries regarding activity increment of esteoclasts and findings resulting genetic mutation in human, animal and all human being are effected at increasing our understand to estrogen skeletal effects in male and female.

2. Implication and statement of the importance:

the sexual steroids play a necessary role at keeping bone safe throughout the life and it can be observed miseffects of hormone defect in male and female animals and young and old people. The performance practice of these affects has not completely recognized and for this reason, that is a subject for research comprehensive effort.

Although the potential treatment results at this case is a considerable subject. The question is that whether these hormones can play a meaningful and determinant role at hone- making and it's keeling. 

How steroid hormones are applied as indicator and procedure for fractures and healing of bone in sterility and ansterillity male animals and even in female animals that they are affected to defect and disorder at steroid hormones.

Methodology: experimental study

Statistical population and performance stages description:

Ten adult male rabbit were chosen from

Laboratory type of healthy obviously and it has become sterility by method of scrotal and over tibia bone from lateral side, four pole in diameter 1,2,3,4 mm along the bone has been prepared and then it has been divided to two groups.

First group: Nondrolon Decanat drug was injected at days intervals 0, 7, 14, 21, 28, 35, 42, 50, 57 by muscular.

Second group: Cyprotrone drug was feeded once each two days until day 57 to rabbits.

Independence variables: Nondrolon Decanat and Cyprotrone acetate.

Dependence variables: the amount of skeletal texture formation - the amount of callus formation pressure tolerance.

Hypothesis:

How much androgens are an effective at healing and regeneration of bone.

Data collecting method:

Radiographic evaluation was made at days 0, 15, 30, 45, 60.

At Histophatologic evaluation was deliverd the bone samples to phatology laboratory at late day (day 60).

Pace position evaluation was made at days 1, 7, 14, 28, 35,45 and 60.

Statistical method of information analysis:

Regarding radiographs time period evaluation which it was enjoyed on natural distribution, it was applied from Analysis of variance tests at ros meaningful level.

Regarding the pace position which it was placed at grade measurment, it was applied from kruskal-wallis test. A statistical calculations were made using SPSS statistical program (statistical package for social sciences).

Conclusions:

The pace position of rabbits is improved at both groupsfrom one to 60 days by meaningfully.

On the other hard, there is no meaningful difference between two groups of various times and between difference times at each groups, unless at case of day 1 and 7 that this difference is a natural completely.

There is meaningful difference at both groups in associated to formed callus amount at some times. With regard to phatology, first and second evaluation was indicator of regeneration and formation of bone callus at both groups, but by comparative, first group had more volume and broad callus and the whole of regeneration trend had more progressive stages.

Key words: Nondrolon, Cyprotrone, Bone heeling.

Address:

1-Dr. Gholamreza, Abedi. Assistant Proffessor of  Veterinary Specialized Science Faculty Azad University Technology and Science Unit..

2- Dr. Parviz, Tajik. Associator Proffessor of Veterinary Faculty of Tehran University.

3- Dr. Reza, sedghat. Assistant Proffessor of Medical Faculty of Shahed University of Tehran.